Определение осмотической стойкости эритроцитов
Описание
Синонимы (rus): Осмотическая стойкость эритроцитов, сфероцитоз, талласемия, гемолитическая анемия
Синонимы (eng): Osmotic fragility, spherocytosis,thalassemia, hemolytic anemia
Биоматериал: Венозная кровь
Показатель(и): Осмотическая стойкость эритроцитов
Метод(и): Осмотический лизис
Тип контейнера и особенности преаналитики: Пробирка для гематологических исследований с EDTA, 2 мл (фиолетовая крышечка). Тест на осмотическую стойкость эритроцитов выполняется в свежеприготовленной крови (в течение 2 часов после сбора), а также после инкубации при 37 ° С в течение 24 часов.
Тест на осмотическую стойкость эритроцитов используется для измерения устойчивости эритроцитов к гемолизу при воздействии разных концентраций солевого раствора. Когда эритроциты подвергаются воздействию гипотонической среды, вода попадает в клетку и приводит к ее лизису. Тест на осмотическую стойкость эритроцитов представляет собой классический тест для диагностики наследственного сфероцитоза. Сфероциты являются осмотически менее стойкими клетками, которые легче лизируются в гипотоническом растворе, по сравнению с нормальными эритроцитами. Классический осмотический тест на осмотическую стойкость, первоначально описанный Parpart et al. (1947), заключается в добавлении цельной крови в серию солевых растворов в диапазоне от 0,1% до 0,9%. Эти образцы подвергают центрифугированию с измерением оптической плотности при 540 нм, чтобы рассчитать процент гемолиза для каждого раствора.
Когда назначается
Диагностика наследственного сфероцитоза, талассемии и гемоглобинопатии, гемолитической анемии неясного генеза
Подготовка к анализу
Специальной подготовки не требуется. Исследование проводится натощак (не принимать пищу 3 часа до исследования, можно пить воду).
Расшифровка/Интерпретация
Пониженная осмотическая стойкость эритроцитов характерна для пациентов с наследственным сфероцитозом. Сфероциты являются осмотически менее стойкими клетками, которые легче лизируются в гипотоническом растворе, по сравнению с нормальными эритроцитами. Тест на осмотическую стойкость после инкубации цельной крови в термостате при t=37° С считается более чувствительным, чем тест на осмотическую стойкость эритроцитов без инкубации. Пониженная осмотическая стойкость также может наблюдаться при других заболеваниях, включая наследственный стоматоцитоз, наследственный пиропойкилоцитоз, врожденную дизэритропоэтическую анемию типа II. Данный феномен также может быть ассоциирован с аутоиммунной гемолитической анемией, отравлениями, ожогами, состояниями после гемотрансфузии. Повышенная осмотическая стойкость эритроцитов указывает на наличие сплющенных эритроцитов (лептоцитов), у которых снижено соотношение площади поверхности к объему. Такое изменение происходит при железодефицитной анемии, талассемии и серповидноклеточной анемии, так как эритроциты с низким содержанием гемоглобина (MCH) и низким средним объемом клеток (MCV) необычайно устойчивы к осмотическому лизису. Ретикулоциты и эритроциты у пациентов после спленэктомии также более осмотически устойчивые по сравнению с нормальными клетками. При заболеваниях печени вследствие пассивного накопления липидов эритроциты также более устойчивы к осмотическому лизису.
Список литературы
- Farias MG et al. Advances in laboratory diagnosis of hereditary spherocytosis - Clin Chem Lab Med., 2017 Jun 27,55(7): p. 944-948
- Bolton-Maggs PH et al. Guidelines for the diagnosis and management of hereditary spherocytosis--2011 update. - Br J Haematol, 2012 Jan;156(1):p.37-49
- Walski T et al. Individual osmotic fragility distribution: a new parameter for determination of the osmotic properties of human red blood cells. - Biomed Res Int. 2014; 2014:162102.