Циркулирущие иммунные комплексы.
Образование иммунных комплексов является частью нормальных процессов взаимодействия антитела с антигеном. Появление экзогенного антигена в крови и гуморальный иммунный ответ являются основной причиной формирования циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК). Нередко иммунные комплексы могут состоять исключительно из иммуноглобулинов, например при криоглобулинемиях и болезни Шенлейна-Геноха, что может быть обусловлено нарушением синтеза антител при этих заболеваниях. При аутоиммунных заболеваниях формируются ЦИК между аутоантителами и аутоантигенами.
Связывание антигена со специфическими антителами приводит к образованию иммунных комплексов, которые могут захватываться рецепторами к Fc-фрагментам молекул иммуноглобулинов и к комплементу на клетках ретикулоэндотелиальной системы, обеспечивающих клиренс иммунных комплексов. При иммунокомплексной патологии формируются избыточные количества ЦИК, нарушается нормальный клиренс ЦИК, а также снижается растворимость образующихся иммунных комплексов. Именно снижение растворимости ЦИК приводит к их отложению в сосудистой стенке и развитию воспаления. Снижение растворимости при замедлении скорости кровотока и температуры приводит к тому, что ЦИК поражают преимущественно капилляры и, прежде всего, капилляры кожи. В результате ЦИК откладываются в стенке мелких сосудов, что приводит к активации комплемента, синтезу анафилотоксинов и цитокинов и последующему развитию лейкоцитарного инфильтрата в мелких сосудах кожи.
В отличии от мало-чувствительного теста по осаждению иммунных комплексов с помощью полиэтиленгликоля (ПЭГ-преципитация), который определяет присутствие в сыворотке непатогенных комплексы большой молекулярной массы, для обнаружения ЦИК в большинстве клинических исследований используется высокочувствительная реакция связывания C1q фактора комплемента, определяющая патогенные иммунные комплексы. Патогенные иммунные комплексы способны активировать систему комплемента, приводят к васкулитам, гломерулонефритам, полиневритам и другим симптомам иммунокомплексных заболеваний.
Выявление ЦИК признано полезным, дополнительным лабораторным параметром при системной красной волчанке (СКВ), синдроме Шегрена, ревматоидном артрите, воспалительных заболеваниях кишечника, иммунокомплексных васкулитах, гломерулонефритах различного генеза. Высокая концентрация ЦИК соответствует обострению иммунокомплексного процесса и требует медикаментозной коррекции. Одновременно с содержанием ЦИК необходимо выполнять тесты, оценивающие систему комплемента, такие как CH50, C3 и C4. Потребление комплемента наряду с увеличением содержания ЦИК служит признаком текущей активности иммунокомплексного васкулита и требует принятия активных мер. Рекомендуется проспективное определение комплемент-фиксирующих патогенных ЦИК для оценки активности заболевания и эффективности терапии.
Общая гемолитическая способностью сыворотки.
Система комплемента является интегральной частью иммунной системы. Она состоит из группы сывороточных белков, которые участвуют в гуморальной фазе воспаления и защищают организм от инфекций, разрушая бактериальные клетки. Белки системы комплемента также способствуют клиренсу иммунных комплексов и мертвых клеток. При ряде заболеваний активные факторы системы комплемента могут приводить к анафилактическим и цитотоксическим реакциям. Врожденный и приобретенный дефект системы комплемента проявляется выраженными иммунодефицитами с неспособностью организма сопротивляться бактериальным и вирусным инфекциям, кроме того, недостаток ряда факторов комплемента может приводить к развитию иммунокомплексных аутоиммунных заболеваний, таких как СКВ.
Для оценки системы комплемента применяется как исследование отдельных факторов комплемента (например С3 и С4), кроме того, используются тесты, позволяющие судить о состоянии системы комплемента в целом. Важным методом оценки системы комплемента является исследование общей гемолитической активности сыворотки (CH-50). Данное исследование является чувствительным и воспроизводимым методом для выявления генетических дефектов системы комплемента у больных с повторяющимися инфекциями и наследственными формами иммунодефицитов, проявляющихся СКВ-подобными синдромами, у которых СН-50 значительно снижено или не определяется. Кроме того, снижение СН-50 отмечается при потреблении белков комплемента в ходе иммуновоспалительного процесса или аутоиммного иммунокомплексного заболевания.
Измерение активности комплемента сыворотки позволяет выявлять врожденные дефекты компонентов системы комплемента. Дефицит ранних компонентов системы комплемента может приводить к сниженной способности устранения вирусных антигенов и склонности к иммунокомплексным заболеваниям. Гомозиготные дефициты компонентов комплемента являются крайне редкими, однако гетерозиготы с отсутствием одной аллели отмечаются часто и сопровождаются низкими уровнями факторов комплемента и снижением СН-50.
Недостаточность С1, С4 и С2 проявляется волчаночноподобным заболеванием, сочетающим клиническую картину артралгий, гломерулонефрита с кожными проявлениями, васкулитом и лихорадкой. При селективном дефиците факторов классического пути повторные гнойные инфекции почти не наблюдаются, в отличие от наследственных комплементопатий, затрагивающих конечный путь активации комплемента. Эти формы врожденных энзимопатий проявляются обычно уже в раннем дошкольном возрасте. Так, дефицит С3 является причиной повторных, часто жизнеугрожающих, бактериальных инфекций, таких как септицемия, пневмония и менингит. Врожденная недостаточность С5, С6, С7 и С8 сопровождается рецидивирующими гонококковыми инфекциями с септицемией и артритом, а также рецидивирующими пневмококковыми инфекциями. Наиболее важным признаком дефицита основных компонентов комплемента является абсолютное отсутствие детектируемого содержания комплемента CH-50, в то время как при иммунокомплексных заболеваниях с потреблением комплемента все же имеется определяемый уровень СН-50. Выявление потребления комплемента сопровождается снижением СН-50 и характеризует активно текущий иммунокомплексный процесс.
Ингибитор С1 эстеразы (С1INH).
Для подавления неспецифической активации комплемента существует ряд растворимых и мембрано-ассоциированных ингибиторов системы комплемента, которые в норме предотвращают неспецифическую активацию комплемента на мембранах собственных клеток человеческого организма. Одним из таких растворимых ингибиторов является С1-эстераза – гликопротеин с функцией ингибирования протеаз. С1-эстераза ингибирует начальные компоненты системы комплемента (С1s, C2, C4), кроме того она участвует в естественном подавлении калликреин-кининовой системы и взаимодействует с рядом факторов свертывания.
Дефицит функции С1-ингибитора относится к одним из самых частых врожденных недостаточностей системы комплемента и приводит к развитию наследственного ангионевротического отека. Это заболевания характеризуется генерализованным отеком, наиболее опасным проявлением является отек гортани. Причиной является увеличение сосудистой проницаемости под действием избытка брадикинина, который формируется под действием в норме подавленного фермента калликреина. Рекомендуется определять активность С1-ингибитора одновременно с исследованием С3 и С4 факторов комплемента.
Снижение активности эстеразы ниже 40% указывает на функциональный дефект С1INHпри наследственной форме ангионевротического отека и подтверждает диагноз этого заболевания. Существуют редкие приобретенные формы этого заболевания, развивающиеся во взрослом возрасте, нередко на фоне множественной миеломы или лимфопролиферативных заболеваний. Обычно низкая активность С1-эстеразы сопровождается снижением концентраций С4 компонента комплемента в сыворотке за счет его потребления.
Неоптерин является метаболитом нуклеиновых оснований, который синтеризуется преимущественно макрофагально-моноцитарными клетками под действием интерферона-гамма.Продукция неоптерина значительно возрастает при активации клеточного иммунитета при вирусных инфекциях, туберкулезеи аутоиммунных заболеваниях. Нормальные уровни неоптерина снижают вероятность активной фазы аутоиммунного заболевания или вирусной инфекции, однако концентрация неоптерина остается в норме при местных и системных бактериальных инфекциях. Высокие уровни неоптерина отмечаются при следующих процессах: острые вирусные инфекции (корь, ветрянка); хронические вирусные инфекции (гепатиты В и С, ВИЧ, цитомегаловирус); инфекции простейшими и глистные инвазии; туберкулез; системная красная волчанка; аутоиммунные заболевания печени; воспалительные заболевания кишечника; саркоидоз; отторжение трансплантата и реакция трансплантат против хозяина; ожог и массивная травма.
Аутоиммунная гемолитическая анемия (АГА) – заболевание, при котором происходит повышенная деструкция эритроцитов антиэритроцитарными аутоантителами различных классов иммуноглобулинов с участием или без участия компонентов комплемента. Частота встречаемости АГА варьирует от 0.6 до 3 на 100 тысяч человек. Этиология до сих пор остается не известной. АГА может быть первичной и вторичной. При первичной АГА гемолиз в анализах является единственным клиническим симптомом в отсутствие системных заболеваний, которые могли бы объяснить присутствие антител. Вторичная АГА встречается на фоне аутоиммунных заболеваний (системная красная волчанка, болезнь Крона, язвенный колит, системная склеродермия и др.), опухолевых процессов (лимфома, хронический лимфолейкоз, миелодиспластический синдром), иммунодефицита, инфекций (Mycoplasma pneumoniae, вирус Эпштейн-Барр, цитомегаловирус) и приема некоторых лекарственных препаратов (цефалоспорины, НПВС, интерферон-альфа, α-метилдопа , прокаинамид и др.).
Также АГА, в зависимости от оптимальной температуры для реакции антиэритроцитарных антител с антигенами на поверхности эритроцитов, делятся на тепловые (t=37о С), холодовые (t< 37о С) и смешанные. При тепловой АГА антитела направлены на антиген из системы резус (Rhnull), который присутствует у всех людей на поверхности эритроцитов, независимо от резус-принадлежности.
При холодовой АГА, или болезни холодовых агглютининов антитела направлены против I/i -антигенов на поверхности мембран эритроцитов и приводят к агглютинации эритроцитов при температуре <37 оС.
Прямая моноспецифическая проба Кумбса – лабораторный тест, позволяющий определить наличие антиэритроцитарных антител IgG, IgA,IgM и C3c-,C3-d–компоненты комплемента на поверхности эритроцитов и, таким образом, подтверждающий аутоиммунную этиологию гемолиза. Антитела иммуноглобулинов класса IgG, IgA наиболее характерны для тепловой АГА, IgM, C3c-,С3d-компоненты комплемента – для холодовой. АГА может протекать как бессимптомно, так и с наличием такой клинической симптоматики, как выраженная общая слабость, боли в пояснице, в грудной клетке, одышка, сердцебиение, обмороки, лихорадка, желтуха, спленомегалия, синдром Рейно (при холодовой АГА) и др.
Анализ на холодовую АГА, или болезнь холодовых агглютининов, позволяет обнаружить антиэритроцитарные антитела против I/i -антигенов на поверхности мембран эритроцитов, приводящие к агглютинации эритроцитов при температуре <37 оС (чаще IgM, C3d-,C3c-компоненты комплемента). Положительный результат теста подтверждает наличие болезни холодовых агглютининов.
Болезнь холодовых агглютининов может протекать как бессимптомно, так и с наличием такой клинической симптоматики общая слабость, головокружение, усталость, головная боль, зябкость пальцев, акроцианоз, синдром Рейно. Также могут присутствовать раздражительность, аменорея, жалобы со стороны желудочно-кишечного тракта, спленомегалия, желтуха.